Por: Microbiólogo Juan C. Amezquita
Director de área de microbiología y fitopatología
Laboratorio Doctor Calderón

Microbióloga Kelly S. Chinchilla
Analista del área de microbiología y fitopatología 
Laboratorio Doctor Calderón

Introducción 

El aguacate es una fruta tropical cuya aceptación se ha incrementado gracias a sus propiedades nutricionales y cosméticas, entre las cuales se encuentran los antioxidantes, vitamina E, tocoferoles, luteína, glutatión, lípidos de alta calidad: ω3, ω6 y ω9, etc. Su producción ha aumentado rápidamente en los últimos años y se proyecta que para el 2029 supere los 11 millones de toneladas: más de dos veces y medio el nivel de 2009. La producción de aguacate está concentrada principalmente en 5 regiones y países; los diez principales países productores representan más del 80% de la producción mundial y alrededor del 70% de la producción tiene lugar en América Latina y el Caribe.5,13,23

Colombia ocupa el sexto lugar de los países con mayor área cultivada de aguacate en el mundo. El país ha tenido un crecimiento considerable en los últimos años, registrando en el mes de agosto de 2019 la exportación de 30,000 toneladas de aguacate Hass al mercado internacional. Se han logrado importantes avances en los procesos de exportación de aguacate Hass a China, Japón y mejoras al Plan de Trabajo Operativo -PTO, para facilitar la exportación a Los Estados Unidos.5,6,13

El aguacate Hass tiene una gran oportunidad en la agricultura colombiana para la exportación, dado que se ha convertido en la variedad más comercializada. Para 2010, se reportaron 21.590 hectáreas cosechadas, destacándose los departamentos de Tolima, con 5.835 hectáreas; Bolívar, con 3.533 hectáreas; Antioquia, con 2.907 hectáreas; Cesar, con 1.657 hectáreas; Santander, con 1.379 hectáreas; Caldas, con 1.341 hectáreas, y Valle del Cauca, con 1.130 hectáreas, con un rendimiento promedio nacional de 9.5 toneladas por hectárea5,6,13,23. Se ha presentado un aumento de área sembrada y consumo en los últimos años. Sin embargo, en la actualidad la comercialización del aguacate colombiano ha sido limitada en los mercados especializados debido a la heterogeneidad de los productos cosechados, los bajos estándares de calidad, la variabilidad en los materiales cultivados y las deficiencias en el control fitosanitario de la producción primaria. Además, esta última limitación genera grandes pérdidas ocasionadas por las enfermedades adquiridas a través de las raíces, que han sido de poco estudio, y a la realización de prácticas inapropiadas para el control de enfermedades  como Cylindrocarpon spp., Phytophthora spp., Rosellinia spp., Rhizoctonia spp., Verticillium spp., Fusarium spp., entre otras.12,13,23,26, Dado que muchas de estas están involucrados en la marchitez de aguacate, el complejo Cylindro, que está conformado por los hongos Cylindrocladium sp y Cylindrocarpon sp, ocasiona síntomas muy similares a Phytophthora cinnamomi en campo; sin embargo, los fungicidas utilizados para este hongo no son muy eficaces para este complejo Cylindro18.  El objetivo de este estudio consistió en realizar una evaluación preliminar de fungicidas para el control de Cylindrocarpon spp., Cylindrocladium spp. y Fusarium spp. en aguacate.

Materiales y métodos

Identificación de hongos en plántulas de aguacate 

La identificación de los hongos se realizó por la técnica de impronta en agar Jugo V8 y Agar PDA, que consistió en tomar las plántulas de aguacates y realizar cortes del material vegetal en hojas, tallo y raíz. Posteriormente se realizó un lavado con agua destilada estéril y después se sumergió en hipoclorito de sodio (NaClO) al 2,5% por dos minutos. Enseguida se lavaron con abundante agua para retirar el exceso de hipoclorito de sodio y se procedió a secar para realizar la siembra en Agar Jugo V8 y Agar PDA. Este proceso fue realizado en dos ensayos, el primero para identificar los hongos que afectaban a estas plántulas y el segundo para realizar las improntas en agares mezclados con fungicidas.

Selección de fungicidas 

Se seleccionaron algunos de los fungicidas más usados y conocidos. Se dosificó de acuerdo con producto activo y las referencias de aplicación foliar, lo cual es observado en la tabla 1.

Tabla 1. Fungicidas utilizados para el control de enfermedad fúngica.

Preparación de medios de cultivos con fungicidas

Una vez preparados los medios de cultivos (Agar Jugo V8 y Agar PDA) (imagen 2) y esterilizados antes de realizar el servido en placa, se adicionó la concentración de los fungicidas de acuerdo con su dosificación (g /Lt o mL/Lt), establecida en la tabla 1.

Resultados y discusión

Después de 8 días de incubación de las improntas realizadas en Agar Jugo V8 y Agar PDA para las plántulas de aguacate (imagen 1), se evidenció el crecimiento e identificación de los hongos relacionados en la tabla 2.

Tabla 2. Hongos aislados en planta de aguacate.

Entre los hongos aislados en el material vegetal se encuentra Verticilliumsp. que es reportado en la cartilla fitosanitaria del ICA para este tipo de cultivo, produciendo una afectación en la raíz, como también la produce Cylindricladium sp. De igual manera, se logró evidenciar la presencia de Colletotrichum sp, reportado como hongo causante de la pudrición en los injertos de plántulas de aguacate y de manchas en hojas, brotes y frutos, evidenciando que en los frutos tiene la principal afectación a la calidad, además de disminuir su producción.14,27

Imagen 1. Plántulas de aguacate; A. Plántula con marchitez vascular; B. Planta sana.

Alternaria sp, Pestalotia sp y Cladosporium sp son hongos causantes de secamientos de ramas y manchas foliares, según lo mencionado por Alfaro et al (2017). En el caso de Fusarium spp es el hongo que se aísla con mayor frecuencia en la marchitez del aguacate, lo que concuerda con lo mencionado por Carranza et al (2015), quienes encontraron una incidencia de Fusarium sp del 60,6 % en 75 árboles analizados, seguido de Cylindrocarpon sp y Verticllium sp.  

Efecto de los fungicidas 

Una vez realizada la impronta del material vegetal donde se encontraban los hongos de estudio, pasado el tiempo de incubación de 6 a 10 días se evidenció que los productos activos de los fungicidas utilizados con mejor resultado para el control de Fusarium sp, Cylindrocarpon sp y Cylindrocladium sp fueron Difenoconazol, Carboxin + Captan, Metalaxyl-M + Mancozeb y Benomyl (tabla 3a,b,c) (imagen 3). Estos tuvieron una inhibición del 100% de los hongos, a excepción de Metalaxyl-M + Mancozeb que tuvo una inhibición menor para Fusarium sp, del 75%.

Imagen 2. Fungicidas son mejor resultado; A. Carboxin + Captan; B. Difenoconazol; C. Benomyl; D. Metalaxyl-M + Mancozeb.

Aunque las referencias científicas sean escasas en relación al estudio de la efectividad de los fungicidas utilizados en los ensayos para el control de Fusarium sp., Cylindrocarpon sp. y Cylindrocladium sp, productos como el Difenoconazol tienen un mecanismo de acción sobre la biosíntesis de ergosterol15 en cepas de Fusarium sp., Cylindrocarpon sp y Cylindrocladium sp. 

Este producto mostró una efectividad del 100% en el ensayo realizado. Reportes como los de Gaviria et al (2013) mencionan un porcentaje similar del 100% en el control de Colletorichum sp en mora, evidenciando así la efectividad del producto. Ploper, et al (2015), demostraron una eficacia del 87% del producto activo para el control de hongos como Cercospora kikuchii y Septoria glucynes en cultivo de soja. Guillen et al (2017) observaron una efectividad del 75% para el control de Mycospharella citri en cultivo de naranja; cuando es combinado con Azoxi-difem se logra obtener una efectividad del 88%. Por su parte, Rego et al (2006), de los aislamientos realizados de Cylindrocarpon destructans, observaron una variación en la sensibilidad cuando fue sometido al tratamiento con el Difenoconazol, notando una reducción en las mediciones micelares del hongo, que a diferencia de Procloraz en relación al pie negro de la vid, en estudios más recientes como los de Jarrin, M. (2017) demostró que en una concentración de 10 ppm se inhibe completamente la esporulación de Cylindrocarpon destructans  en el ensayo in vitro en cultivo de mora castilla. 

Paralelamente, los productos Carboxin + Captan son ampliamente utilizados en la curación de semillas. El estudio realizado por Alfolso et al (2008) demostró que el uso de estos productos es eficaz para el control de Fusarium roseum en esquejes de clavel con las técnicas de bloques de agar, pozos y sensidisco en valores de 1.25 g/L, inhibiendo la enzima succínico deshidrogenasa. Así mismo, para el control de Fusarium graminearum, en el ensayo hecho por Lozano, et al (2006) fue más efectivo este producto en la inhibición cuando se mezcló con fungicidas Thiram + Tebuconazole en semillas de trigo harinero; sin embargo, se logró demostrar que cuando es usado Carboxin + Captan se logra un porcentaje de germinación mayor que cuando es mezclado con los fungicidas mencionados. 

Imagen 3. Medios de cultivo (Agar jugo V8 y PDA) + Fungicidas + material vegetal.

Por otra parte, estudios como el de Ramírez et al (2014) demostraron que para el manejo fitosanitario de la marchitez en el aguacate causado por hongos como Cylindorcarpon sp funcionó el uso del producto Mancozeb, Captan y Cobre. Además de la poda y el reconocimiento de los síntomas, este último es eficaz para el control del hongo. Inclusive, los ensayos por Gillen et al (2017) lograron demostrar el 100% de inhibición de Colletotrichum acutatum in vitro; además del control de este hongo, evidenciaron un resultado similar con el fungicida Difeconazol. 
Estudios más recientes como los de Piñeros et al (2019) demostraron que productos como Metalaxyl-m + fludioxonil tuvieron una inhibición del 100% en la germinación de conidios y crecimiento radial para Fusarium subglutinans y Fusarium graminearum asociados a semillas de maíz. De igual manera, el Carboxin + Captan demostraron un porcentaje similar de inhibición en el estudio realizado por Hernández et al (2010) para el control de patógenos fungosos en piña tales como Phytophthora nicotianae, Chalara paradoxa y Fusarium subglutinans. Metalaxyl-m demostró una efectividad en el control de Fusarium subglutinans del 76,5 % de inhibición; adionalmente, cuando fue combinado con Tebuconazol se obtuvo una efectividad del 84,2%. Al mismo tiempo, Lozano et al (2015) evidenciaron que el uso de Metalaxyl tuvo un porcentaje del 100% en la reducción de la enfermedad de la marchitez del chile de árbol causado por hongos como Fusarium oxysporum y Phytophthora capsici.

A su vez, estudios realizados por Pérez et al (2011) para el producto Benomyl demostraron que su uso en la desinfección de las semillas de espinaca permitió mejorar su germinación y la inhibición total del desarrollo de enfermedades causadas por Verticillium sp, Fusarium sp y Phoma sp., De igual manera, Carrero et al (2003) comprobaron la eficiencia de fungicidas para el control de la podredumbre del tallo en plantas de Eucalyptus cinérea, en donde este fungicida permitió la inhibición en la esporulación del hongo Botrytis cinérea. Además esto concuerda con el estudio realizado por Sandoval et al (2011) sobre el control químico y biológico de Fusarium stilboides en pimiento morrón en poscosecha, donde se observa una efectividad del 81% en la inhibicion de la enfermedad en el pedúnculo de frutos de pimiento. Aunque estos productos ensayados no son recomendados en las casas comerciales para el control de la pudrición y marchitez en aguacate, este estudio demostró la efectividad de estos productos en el control de los hongos Cylindrocladium spp., Cylindrocarpon spp. y Fusarium spp., 

Sin embargo, se recomienda realizar un bioensayo directamente en plántulas de aguacates y evaluar diferentes dosis de estos productos químicos para determinar el porcentaje de inhibición tanto en esporulación como germinación de estos hongos.

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por Metroflor
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